Μέθοδο Μοριακή γενετική έρευνα

Για να διερευνηθεί και να εντοπίσει παραλλαγές στη δομή DNA που χρησιμοποιείται γενετική μέθοδο μοριακής. Για κάθε περιοχή DNA, η οποία διερευνά την περιοχή αυτή του χρωμοσώματος, γονίδιο ή αλληλόμορφο, οι μέθοδοι διαφέρουν. Υποκείμενο κάθε γενετική μέθοδος μοριακής περιλαμβάνει μερικές ή άλλου χειρισμού του RNA και DNA. Όλες αυτές οι μέθοδοι χαρακτηρίζονται από μια τεράστια πολυπλοκότητα, χωρίς εργαστηριακές συνθήκες, δεν μπορεί να πραγματοποιηθεί, και το προσωπικό πρέπει να είναι υψηλού επιπέδου. Το έργο πραγματοποιείται σε διάφορα στάδια.

στάδια

Πρώτον, τα δείγματα RNA ή DNA που πρόκειται να παραχθεί. Εδώ, μια γενετική μέθοδος μοριακής μπορεί να εφαρμοστεί σε σχεδόν οποιοδήποτε υλικό: μία σταγόνα αίματος, λευκοκύτταρα, ινοβλάστες καλλιέργειας, βλεννογόνου (ξύνεται), ακόμη και οι θύλακες των τριχών, - DNA μπορεί να ληφθεί από οποιαδήποτε δείγμα. Είναι κατάλληλο να χρησιμοποιήσει οποιαδήποτε μοριακές γενετικές μεθόδους και διάφορες επιλογές τους και έχουν από καιρό απομονωθεί DNA αποθηκεύεται κατεψυγμένο. Το δεύτερο στάδιο είναι αφιερωμένη στην συσσώρευση των επιθυμητών θραυσμάτων (ενίσχυση) του DNA, καθώς βοηθά τη διασφάλιση της αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης in vitro (in vitro χωρίς τη συμμετοχή του ζωντανού οργανισμού). Ως αποτέλεσμα, οι επιλεγμένες θραύσμα DNA πολλαπλασιάζει με αυτή την αλυσίδα αντίδρασης, και η ποσότητα των αυξήσεων DNA κυριολεκτικά εκατομμύρια φορές.

Το τρίτο βήμα στις μοριακές μεθόδους γενετικής έρευνας Υποτίθεται πολλαπλασιασμένη περιορισμού DNA (αυτόν τον κατακερματισμό, σχίσιμο ή κοπή). Περιορισμός εκτελούνται από ηλεκτροφόρηση σε πήκτωμα πολυακρυλαμιδίου ή αγαρόζης. Αυτή η μοριακή-γενετική μέθοδο μελέτης του θραύσματος DNA επιτρέπει σε όλους να λάβει μια ορισμένη θέση στο πήκτωμα. Στη συνέχεια, η γέλη υποβάλλεται σε επεξεργασία με βρωμιούχο αιθίδιο, ικανό να συνδέεται με DNA, η ακτινοβόληση με υπεριώδες φως, τότε είναι δυνατό να παρατηρηθεί τμήματα φωταύγεια. Μοριακές γενετικές διαγνωστικές μέθοδοι είναι ποικίλες και πολυάριθμες, αλλά τα πρώτα δύο βήματα είναι κοινά για όλες. Αλλά για να ταυτοποιηθούν θραύσματα DNA, η γέλη μπορεί να είναι χρωματισμένο, και πολλές άλλες υπάρχουσες μεθόδους.

είδος

Οι πιο άμεσες και διαδεδομένες μεθόδους για την ανίχνευση μυκοβακτηριδίων μπορούν να περιλαμβάνουν την παραπάνω μέθοδο μοριακής γενετικής DNA μάθησης. Η ουσία του είναι ότι, προκειμένου να προσδιοριστεί η αλυσίδα υλικό σάρωσης ειδικών θραυσμάτων του DNA των παθογόνων. Μοριακές γενετικές διαγνωστικές τεχνικές δεν έχουν ακόμη ένα πιο αποτελεσματικό τρόπο για να αναγνωρίσουν τέτοιες ασθένειες όπως η φυματίωση. Χρησιμοποιώντας την αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (PCR), μπορείτε να είστε βέβαιοι ότι η αρχική DNA θα αυξήσει τον αριθμό των αντιγράφων σε ένα εκατομμύριο φορές, δηλαδή, θα υπάρξει ενίσχυση, και θα εμφανίσει τα αποτελέσματα. Το επίπεδο ευαισθησίας είναι πολύ υψηλό - περισσότερο από ενενήντα πέντε τοις εκατό, το οποίο είναι το κύριο πλεονέκτημα αυτής της μεθόδου.

Το υπόλοιπο των μοριακών-γενετικές μεθόδους της έρευνας σχετικά με την αποτελεσματικότητα της απόδοσης πολλαπλών αντιγράφων κυριολεκτικά διπλασιάστηκε, δεδομένου ότι στην περίπτωση αυτή το δείγμα σύνταξη δείχνει μια ειδική αλληλουχία ολιγονουκλεοτιδίου αυξάνεται σε εκατόν έξι φορές. Ακόμη και η διάγνωση του πολιτισμού της φυματίωσης του αναπνευστικού συστήματος μειώσει σημαντικά την ευαισθησία του. Αυτός είναι ο λόγος που η σύγχρονη ιατρική βασίζεται στη μοριακή γενετική μεθόδους διάγνωσης της φυματίωσης. Η περιγραφόμενη μέθοδος είναι αποτελεσματική, ιδίως όταν πρόκειται για παθογόνους παράγοντες υψηλής αντιγονική ποικιλομορφία, καθορίζουν ότι άλλος τρόπος είναι πολύ πιο δύσκολο - απαιτείται ειδική θρεπτικά και καλλιέργεια για μεγάλο χρονικό διάστημα. Βιοχημικές και μοριακές γενετικές μέθοδοι παράγουν πολύ διαφορετική επίδραση στα αποτελέσματα.

διάγνωση της φυματίωσης

Marshall PCR διάγνωση της φυματίωσης συνηθέστερα χρησιμοποιώντας αυτές τις αλληλουχίες DNA που είναι ειδικές για όλους τους τέσσερις τύπους της νόσου. Για την επίτευξη αυτού του στόχου συχνά χρησιμοποιούν εκκινητές που ανιχνεύουν αλληλουχία IS στοιχεία (IS-986, IS-6110), καθώς αυτά τα στοιχεία χαρακτηρίζουν άκρως μεταναστευτικών ειδών Mycobacterium tuberculosis και πάντα παρούσα πολλαπλά αντίγραφα στο γονιδίωμα. Επίσης εκχύλιση του DNA μπορεί να διεξαχθεί από καθαρές καλλιέργειες και Κλινική (πτύελα των ασθενών) με οποιαδήποτε άλλη κατάλληλη μέθοδο. Για παράδειγμα, υπάρχει μέθοδος Boom όπου το ρυθμιστικό λύσης χρησιμοποιείται βασίζεται στην θειοκυανικής γουανιδίνης και σίλικα ως το φορέα DNA. Ο αριθμός των ασθενών που διαφέρουν κακή βακτηριολογική αυξάνεται κάθε χρόνο, και ως εκ τούτου στην κλινική πρακτική έχει δημιουργήσει ένα εντελώς διαφορετικό επίπεδο οργάνωσης: μοριακών-γενετική μέθοδος μελέτης DNA έχει διαδραματίσει σημαντικό ρόλο στη διάγνωση.

Ωστόσο, πρέπει να παραδεχθούμε ότι δεν είναι χωρίς μειονεκτήματα. Η μέθοδος PCR είναι η χρήση του συχνά φέρνει ένα τεράστιο αριθμό των ψευδώς θετικών αποτελεσμάτων, και ο λόγος δεν είναι μόνο τεχνικά λάθη, αλλά και τα χαρακτηριστικά της ίδιας της μεθόδου. Επιπλέον, χρησιμοποιώντας αυτή τη μέθοδο διάγνωσης για τον προσδιορισμό της βιωσιμότητας των μυκοβακτηριδίων, τα οποία έχουν ταυτοποιηθεί, είναι απλά αδύνατο. Αλλά αυτό το μειονέκτημα δεν είναι το πιο σημαντικό. Μοριακές γενετικές μεθόδους διάγνωσης PCR ενέχουν τον κίνδυνο της μόλυνσης του μυκοβακτηριακού DNA. απαιτήσεις πιστοποίησης για το λόγο ότι για τα εργαστήρια PCR έχουν σχεδιαστεί αποκλειστικά σκληρό, χρειάζονται τρεις ξεχωριστούς χώρους. τεχνολογία PCR είναι μοντέρνα και πολύ περίπλοκη, απαιτεί τη χρήση κατάλληλου εξοπλισμού και υψηλής εκπαιδευμένο προσωπικό.

bacterioscopy

Όταν τα αποτελέσματα διάγνωση της ανάλυσης πρέπει να συγκριθούν με άλλα δεδομένα: κλινική εξέταση, ακτινογραφίες, μικροσκόπιο Παπανικολάου, καλλιέργεια και ακόμη απάντηση σε μια συγκεκριμένη θεραπεία είναι πολύ σημαντική. Σε αυτή τη σειρά, οι PCR μελέτες είναι μόνο μία από τις συνιστώσες. Εντοπισμός του παθογόνου στην έγκαιρη διάγνωση μπορεί να είναι η απλούστερη και πιο γρήγορος μεθόδους - βακτηριολογικές.

Εκεί χρησιμοποιείται ένα μικροσκόπιο φωτός (χρωματισμός Ziehl-Neelsen) και φθορισμού (χρωματισμός φθοριοχρώματα). Το πλεονέκτημα είναι η ταχύτητα επίχρισμα τα αποτελέσματα. Αλλά το μειονέκτημα του είναι δικαίως θεωρείται η περιορισμένη ικανότητα λόγω της χαμηλής ευαισθησίας. Ωστόσο, η μέθοδος αυτή δίνεται σύσταση του ΠΟΥ ως το πιο οικονομικό και το έδαφος για τον εντοπισμό ασθενών με φυματίωση. Ανίχνευση των μυκοβακτηρίων βακτηριολογική μέθοδο έχει αξία πρόβλεψης και εκτιμάται ποσοτικά βακτηριακή έκκριση. Πολύ πιο σίγουροι για την αντιμετώπισή της μοριακής γενετικής έρευνας μεθόδους της φυματίωσης.

Πολιτισμοί

Καλύτερη ανίχνευση μυκοβακτηριδίων αναγνωρίζουν πολιτισμικών σπουδών. Σπορά παθολογικό υλικό είναι κατασκευασμένο μέσα στο μέσο αυγού: Mordovsky, Finn II, LJ, και τα παρόμοια. Benchmarks της αντίστασης των μυκοβακτηριδίων στα φάρμακα και έμμεση απόδειξη της αποτελεσματικότητας του αριθμού των μυκοβακτηριδίων και των αποικιών τους in vitro, αν εφαρμοζόμενης μεθόδου της έρευνας πολιτισμού. Για να αυξηθεί το ποσοστό της απομόνωσης των μυκοβακτηρίων ενοφθαλμισμό παθολογικού υλικού συγκρατείται σε πολλαπλά περιβάλλοντα.

Η ικανοποίηση των αναγκών των πολλών πολιτιστικών, παθογόνο συμπεριλαμβανομένων των επιχορηγήσεων και των υγρών. Χρησιμοποιούνται σε αυτό το σύστημα και την ανάπτυξη VANTES αυτοματοποιημένη τύπο μέτρησης. Οι καλλιέργειες θα πρέπει να πραγματοποιηθεί σε επώαση για έως και επτά έως οκτώ εβδομάδες. Με αυτή τη φορά η καλλιέργεια με την έλλειψη ανάπτυξης μπορεί να θεωρηθεί αρνητικό. Ο πιο αποτελεσματικός τρόπος για την ανίχνευση του Mycobacterium tuberculosis εξετάσει βιολογικά δείγματα: διαγνωστικά ινδικά χοιρίδια υλικό Infect, τα οποία είναι εξαιρετικά ευαίσθητα σε ΤΒ.

Ορισμένα στοιχεία

Ενδιαφέρουσες πεδίο μελέτης, το οποίο ανοίχθηκε με διαγνωστικά PCR ήταν να μελετηθεί η μυκοβακτηριδίου φυματίωσης - λανθάνουσα μόλυνση. Η σύγχρονη έννοια της φυματίωσης δείχνει ότι στους εκατό ανθρώπους που ήταν σε επαφή με το μυκοβακτηρίδιο φυματίωσης, ενενήντα μπορεί να μολυνθεί, αλλά μόνο δέκα από αυτούς είναι ενεργό νόσο αναπτύσσεται. Άλλοι έχουν ανοσία φυματίωση, και επειδή ενενήντα τοις εκατό των περιπτώσεων η μόλυνση παραμένει λανθάνουσα. Εντοπισμός ένα μοτίβο βοήθησε μια γενετική μέθοδο μοριακής.

Γενετιστές λένε ότι πενήντα πέντε τοις εκατό των οποίων οι καλλιέργειες παθολογικό υλικό ήταν αρνητικά, ογδόντα τοις εκατό των ανθρώπων που μολύνονται με M. tuberculosis, αλλά ρέει χωρίς ακτινολογική εκδηλώσεις της νόσου, PCR θετικές απαντήσεις. Είναι μια γενετική διαγνωστική μέθοδος βοήθησε στην αναγνώριση ασθενών που διατρέχουν κίνδυνο από τις μελέτες PCR, με τα αποτελέσματα των αναλύσεων αυτών (μικροσκοπία και καλλιέργεια) ήταν αρνητικές, και υποκλινική μόλυνση μυκοβακτηριδίου φυματίωσης ήταν παρούσα.

σύγχρονη έρευνα

Η Ρωσική Ομοσπονδία και βακτηριολογική εργαστήρια χρησιμοποιούν μια ταχεία μέθοδο απόλυτες συγκεντρώσεις: νιτρικών δραστικότητα ρεδουκτάσης των μυκοβακτηριδίων δοκιμάζονται από αντιδραστήριο Griess. κέντρα Anti-TB χρησιμοποιούν μια μέθοδο που επιτρέπει τον προσδιορισμό της αντίστασης στα φάρμακα. Αυτή η σπορά σε υγρά μέσα, όπου αυτοματοποιημένη ραδιομετρική και φθορίζοντα λογιστικό σύστημα ανάπτυξης των μυκοβακτηριδίων. Η ανάλυση γίνεται γρήγορα - έως και δύο εβδομάδες.

Επί του παρόντος, νέες μέθοδοι έχουν αναπτυχθεί: αντοχή φαρμάκου των μυκοβακτηριδίων μετράται στο επίπεδο γονότυπο. Μελέτη των μοριακών μηχανισμών των γονιδίων αντοχής και δείχνει την παρουσία στα μυκοβακτήρια. Αυτά τα γονίδια σχετίζονται με την αντίσταση σε ορισμένα φάρμακα. Για παράδειγμα, τα γονίδια Kasa, Inha, katG ανθεκτικού σε ισονιαζίδιο, rpoB γονιδίου - ριφαμπικίνη γονίδια RNA 16Sp και rpsL - στρεπτομυκίνη, ΕΜΒ1 - να αιθαμβουτόλη, gyrA - μια φθοριοκινολόνη και ούτω καθεξής.

μεταλλάξεις

Η σύγχρονη διάγνωση αύξησε σημαντικά τη μέθοδο μοριακό-γενετικό επίπεδο για τη μελέτη του DNA και αφέθηκε να πραγματοποιήσει μελέτες μεγάλης κλίμακας των μεταλλάξεων σε όλο το φάσμα τους. Τώρα ξέρουμε ότι οι πιο κοινές μεταλλάξεις στα 516, 526 και 531 κωδικόνια του γονιδίου rpoB, και προσδιόρισε την αντίσταση σε διάφορα φάρμακα. Υπάρχει μια ολόκληρη σειρά από μεθόδους για την πληκτρολόγηση των μυκοβακτηριδίων χρησιμοποιώντας όχι μόνο τις παραδοσιακές μεθόδους - βιοχημικές, βιολογικές και πολιτιστικές, αλλά επίσης ευρέως χρησιμοποιούνται σύγχρονες τεχνικές μοριακής γενετικής. Ήδη υπάρχουν επαρκείς και προβλέπουν τη σωστή μέθοδο διάγνωσης για την ανίχνευση των μονογονιδιακών ασθενειών. Βασίζονται σε μελέτες DNA στην ακριβή περιοχή ενός συγκεκριμένου γονιδίου. Αυτό είναι συνήθως μια πολύπλοκη διαδικασία, χρονοβόρα και δαπανηρή, αλλά τα δεδομένα που παρέχονται από μοριακή γενετική ανάλυση, είναι πολύ πιο ακριβή και ενημερωτική από ό, τι τα δεδομένα όλων των άλλων αναλύσεων.

Είναι από μακρού γνωστό ότι το DNA δεν αλλάζει για όλη τη διάρκεια ζωής του οργανισμού ότι είναι εν πάση εμπύρηνα κύτταρα odnakova, και αυτό καθιστά δυνατό να ληφθεί το ανάλυση των απολύτως όλα τα κύτταρα του σώματος, σε οποιοδήποτε στάδιο της οντογένεσης. Το κατεστραμμένο γονίδιο μπορεί να ανιχνευθεί πριν από την εμφάνιση των πρώτων συμπτωμάτων με την κλινική νόσο πλήρους κλίμακας, καθώς και σε υγιείς ετερόζυγα άτομα, αλλά έχουν μια μετάλλαξη στο γονίδιο. Μοριακές διαγνωστικές μεθόδους γενετικής κληρονομική ασθένεια επιτρέπουν να αποκαλύψουν (άμεση προσέγγιση, DNA-διαγνωστικά) της, καθώς και για την ανάλυση της διαχωρισμό της νόσου στην οικογένεια με τόπους δείκτη DNA (γενετικοί πολυμορφισμοί), οι οποίες συνδέονται στενά με ένα κατεστραμμένο γονίδιο (δηλαδή, η έμμεση προσέγγιση της DNA-διάγνωσης). Άμεσα ή έμμεσα - οποιαδήποτε διαγνωστική DNA βασίζεται στις μεθόδους ταυτοποίησης μιας αυστηρά καθορισμένο τμήμα του ανθρώπινου DNA.

άμεσες μεθόδους

Άμεσες μέθοδοι DNA διάγνωσης είναι όταν το γονίδιο ένοχος κληρονομική ασθένεια είναι γνωστή, όπως είναι πολύ γνωστό, και οι τύποι των μεταλλάξεων του. Για παράδειγμα, μία κατάλληλη άμεσες μεθόδους σε έναν αριθμό ασθενειών. Αυτή η χορεία του Huntington (επέκταση CTG-επαναλήψεις), φαινυλκετονουρία (R408W), κυστική ίνωση (delF508, μεγάλες μεταλλάξεις) και τα παρόμοια. Το κύριο πλεονέκτημα της άμεσης μεθόδου είναι μια πλήρως ελεγχόμενη διαγνωστική ακρίβεια, και δεν υπάρχει καμία ανάγκη να κάνει μια ανάλυση του DNA του υπόλοιπου της οικογένειας. Εάν βρεθεί μια μετάλλαξη στο αντίστοιχο γονίδιο, που επιτρέπει ακριβώς να εγκρίνει τη διάγνωση της κληρονομικότητας, τον προσδιορισμό του γονότυπου για το υπόλοιπο της επιβαρυνθεί οικογένειας.

Ένα άλλο πλεονέκτημα της άμεσης διάγνωσης θεωρείται να προσδιορίσει μια ετερόζυγη φορέας των κακών μεταλλάξεων από τους συγγενείς και τους γονείς που έχασαν τη ζωή τους από την ασθένεια. Αυτό ισχύει ιδιαίτερα για τις ασθένειες αυτοσωματικό υπολειπόμενο. Μειονεκτήματα της άμεσης μέθοδοι είναι επίσης διαθέσιμες. Για την εφαρμογή τους, θα πρέπει να γνωρίζετε ακριβώς εντοπίζεται το παθολογικό γονίδιο, το εξόνιο-ιντρονίου δομή του φάσματος του και τις μεταλλάξεις του. Δεν είναι όλες οι μονογονιδιακές ασθένειες σήμερα έχουν λάβει τέτοιες πληροφορίες. Πληροφορήσεως άμεσες μεθόδους δεν μπορεί να θεωρηθεί πλήρης, επειδή ένα και το ίδιο γονίδιο μπορεί να έχει ένα μεγάλο αριθμό παθολογικών μετάλλαξης που προκαλεί την ανάπτυξη των κληρονομικών ασθενειών.

έμμεσες μεθόδους

Έμμεσες μέθοδοι στη διαγνωστική DNA χρησιμοποιούνται καθόλου, σε άλλες περιπτώσεις, εάν το κατεστραμμένο γονίδιο δεν ταυτοποιηθεί, αλλά μόνο χρωμοσωματικά, ή αν η γραμμή διάγνωση δεν έδωσε το αποτέλεσμα (αυτό συμβαίνει, εάν το γονίδιο σύμπλοκο μοριακή οργάνωση ή ένα μεγάλο βαθμό, εάν υπάρχουν πολλά παθολογικές μεταλλάξεις). Έμμεσες μέθοδοι εκτελούνται ανάλυση διαχωρισμού των πολυμορφικών δεικτών στην οικογένειά αλληλόμορφων. Δείκτες που βρέθηκαν στην ίδια χρωμοσωμική περιοχή ή τόπο συνδέεται στενά με την ασθένεια και αντιπροσωπεύουν εξαλείψεις ή ενθέσεις, υποκαταστάσεις σημείο, επαναλήψεις, και πολυμορφισμός τους οφείλεται στην διαφορετική ποσότητα των κυττάρων στο μπλοκ.

Πιο βολικό για την έμμεση διάγνωση θεωρείται μικροδορυφόρων και μινιδορυφορικά πολυμορφισμούς, που είναι ευρέως διαδεδομένη στο ανθρώπινο γονιδίωμα. η αξία τους εκφράζεται σε υψηλό περιεχόμενο πληροφοριών, εάν βλάβη στον γενετική απόσταση μεταξύ του δείκτη και του γονιδίου δεν είναι πολύ μεγάλο. Στην τελευταία περίπτωση, η ακρίβεια εκτίμησης προσδιορίζεται σε μεγάλο βαθμό την συχνότητα του ανασυνδυασμού μεταξύ του πολυμορφικού σημειωτή και ζημιές. Έμμεσες διαγνωστικές μέθοδοι παρέχουν επίσης υποχρεωτική προκαταρκτικό βήμα συχνοτήτων αλληλόμορφο του αναλύονται πληθυσμιακή μελέτη μεταξύ ασθενών και φορέων των μεταλλάξεων, καθώς και την αναγκαιότητα του προσδιορισμού της πιθανότητας ανασυνδυασμού των nonequilibrium και πρόσφυση δείκτες και μεταλλαγμένα αλληλόμορφα.

άλλες μέθοδοι

Σύντομη τμήματα του RNA ή DNA, όπως επίσης και μοναδικό γονίδιο κατέστησαν ορατές κάτω από μικροσκοπική μελέτη δεν μπορεί να είναι, ως εκ τούτου, για τον εντοπισμό μεταλλάξεων που απαιτούνται από μοριακή γενετική διάγνωση. Υπάρχει ένα «Πρόγραμμα του Ανθρώπινου Γονιδιώματος», καθώς και άλλες εξελίξεις στη μοριακή γενετική επέκτεινε σημαντικά την πιθανότητα της διάγνωσης κληρονομικών ασθενειών - τόσο πριν όσο και μετά τον τοκετό. Αυτές οι μέθοδοι μπορούν να παρέχουν έγκαιρη διάγνωση και να κάνει μια πολυ πρόβλεψη και μονογονιδιακές ασθένειες, των οποίων το ντεμπούτο λαμβάνει χώρα στην ενήλικη ζωή. Δυστυχώς, λόγω των τεχνικών δυνατοτήτων της μοριακής γενετικής μελέτες είναι μερικές φορές πέρα από τα ηθικά όρια που τίθενται σε σχέση με την κληρονομικότητα, ειδικά όταν η διάγνωση είναι στην εφηβεία και την παιδική ηλικία.

Διαρθρωτικά Ταμεία και αριθμητικές χρωμοσωμικές ανωμαλίες είναι οι πιο κοινές αιτίες των ασθενειών και του καρκίνου, και πολλά δυσπλασίες. Χρωμοσωμικές ανωμαλίες πρέπει να εντοπιστούν, η οποία είναι σημαντική για την οικογενειακή συμβουλευτική - να αξιολογήσει την πρόβλεψη, μαζί με την αναπαραγωγική κινδύνου σε μελλοντικές εγκυμοσύνες. χρωμοσωμική ανάλυση είναι το «χρυσό πρότυπο» της γενετικής διάγνωσης, αλλά είναι περιορισμένη. Μόνο οι μέθοδοι της μοριακής γενετικής ανάλυσης μπορεί να κάνει περισσότερα, επειδή χρησιμοποιείται εκεί κλωνοποίησης φθορίζουσες σημάνσεις που βασίζονται στην τεχνολογία ικανή υψηλή ευαισθησία τους για τον εντοπισμό λεπτές χρωμοσωμικές αλλαγές που είναι αδύνατον να ανιχνεύσουν την κλασική κυτταρογενετική μελέτες. Οι τεχνικές αυτές επεκτείνονται όλο και περισσότερο διαγνωστικές δυνατότητες μας, όταν εξετάστηκαν, τα παιδιά με αναπτυξιακές αναπηρίες, νοητική υστέρηση, με πολλές άλλες κληρονομικές ασθένειες.

ευρήματα

Είναι πολύ σημαντικό για την ανθρωπότητα ήταν η γονιδιακή δομή και τη λειτουργία των γνώσεων, τύπων μεταβλητότητα, η ικανότητα να ανιχνεύει κληρονομικές ασθένειες που συνέβη σε σχέση με την ανάπτυξη της μοριακής γενετικής. Οι μέθοδοι της στοχεύουν στην μελέτη του μορίου του DNA - και όταν είναι φυσιολογικό, και όταν έχει υποστεί βλάβη. Παρασκευή αλληλουχιών δεοξυριβονουκλεϊκού οξέος νουκλεοτιδίων (DNA) εκτείνεται σε στάδια από τη λήψη δειγμάτων για την ταυτοποίηση επιμέρους θραύσματα. Απομόνωση γονιδιωματικού DNA από τα κύτταρα, περιορισμού (σχίσιμο), ενίσχυση (κλωνοποίηση), ηλεκτροφόρηση των θραυσμάτων (διαχωρισμό ηλεκτρικό φορτίο τους και το μοριακό βάρος με ηλεκτροφόρηση σε πήκτωμα αγαρόζης). Ταυτοποίηση των ειδικών θραυσμάτων που βρίσκεται στην επιφάνεια ενός διακριτού λωρίδα.

Τότε μπουν τα πράξη ειδικά φίλτρα, μέσω του οποίου διέρχεται ο ένας τον υβριδισμό θραύσματος με θραύσματα κλωνοποιημένου DNA ή συνθετικού ραδιενεργών ανιχνευτών είναι ένα στοιχείο ελέγχου, το οποίο θα είναι ίση σε κάθε δείγμα δοκιμής. Εάν αλλάξετε τη θέση ή το μήκος σε σύγκριση με τον ανιχνευτή, εάν ένα νέο θραύσμα ή εξαφανίστηκε - όλα αυτά υποδηλώνει ότι η αναλύθηκε γονίδιο έχει υποστεί αναδιάρθρωση στην νουκλεοτιδική αλληλουχία. Υπάρχουν οκτώ βασικές τεχνικές της μοριακής γενετικές μελέτες: αλληλούχιση (προσδιορισμός της αλληλουχίας του DNA), αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (αύξηση του αριθμού των αλληλουχιών), η παρασκευή των εκκινητών γνωστών γονιδίων, κλωνοποίηση DNA, παραγωγή ανασυνδυασμένων μορίων πρωτεϊνών που προέρχονται λόγω ανασυνδυασμένων μορίων, δημιουργώντας ένα πλήρες σύνολο (συλλογή βιβλιοθήκη) κλωνοποιημένα θραύσματα τα οποία ελήφθησαν με τη χρήση περιορισμού.